六、白细胞介素6（interleukin‐6，IL‐6）测定

基本原理:IL‐6的细胞依赖株有7TD1、B9、MH60·BSF2、KD823等,用IL‐6依赖株检测IL‐6是最为敏感和特异的方法。1）取对数生长的依赖株细胞，用Hanks液洗两遍，重悬于RPMI‐1640培养液中，置37℃孵育30min，再洗两遍，调整细胞数为2 × 105／ml。2）7TD1细胞在体外长期传代，可引起对IL‐6的依赖性降低，以致检测IL‐6时，阴性对照细胞不死亡，本底过高。3）B9细胞可对小鼠IL‐4产生应答，因此用B9细胞检测混合有IL‐4和IL‐6的样品时，可用抗小鼠IL‐4单抗11B11封闭IL‐4的生物活性。用于逆转录PCR检测IL‐6的引物为：IL‐6 5 ′ 639 ATGAACTCCTTCTCCACAAGC。